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本文標(biāo)題:染色體彩繪一般用于鑒定含高度保守基因的細(xì)菌

信息分類(lèi):站內(nèi)新聞　新聞來(lái)源：未知發(fā)布時(shí)間：2017-8-26 0:31:13

染色體彩繪一般用于鑒定含高度保守基因的細(xì)菌

染色體彩繪及原位反轉(zhuǎn)錄

另外兩種FISH技術(shù)是染色體彩繪(chromosome painting)和原

位反轉(zhuǎn)錄(in situreverse transcription, ISRT)。前一種技術(shù)用

于鑒定自然樣品中微生物群落的特殊基因，而后一種鑒定特殊mRNA

(即已經(jīng)表達(dá)的基因)。

染色體彩繪是將一段寡核昔酸探針或者將一個(gè)完整基因、一系

列基因、甚至整個(gè)基因組用一定方法消化得到的小探針與熒光標(biāo)簽

結(jié)合，然后將這些探針與自然樣品中微生物的DNA雜交.染色體彩繪

一般用于鑒定含有特殊高度保守基因的細(xì)菌，如編碼固氮酶基因、

編碼光合作用反應(yīng)中心的基因、編碼特殊自養(yǎng)途徑的基因，在樣品

中根據(jù)熒光細(xì)胞的數(shù)目可分別估算固氮菌、光合細(xì)菌或自養(yǎng)菌的數(shù)

目。

原位反轉(zhuǎn)錄(ISRT) FISH與染色體彩繪不同，它用于檢測(cè)自然

樣品中細(xì)胞的基因表達(dá).這種方法使用一種可與樣品細(xì)胞中已轉(zhuǎn)錄

的特殊mRNA雜交的探針，一旦探針發(fā)生作用時(shí)，將進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成

互補(bǔ)的DNA，并通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA，隨后擴(kuò)增的DNA再與

熒光探針?lè)磻?yīng),ISRT FISH一般用于研究自然群體中控制基因表達(dá)的

因子，并觀察特殊基因轉(zhuǎn)錄對(duì)樣品產(chǎn)生的影響。